日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 洪炀

作者： 洪炀;韩宏晓;彭金彪;李晔;石耀军;傅志强;刘金明;李祥瑞;林矫矫

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;蛋白酶体α2亚基;克隆;表达;免疫保护

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2010 年 26 卷 04 期

页码： 96-103

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 26S蛋白酶体是一种能够降解大多数内源性蛋白的多亚基复合物,它的蛋白降解作用能够影响细胞周期、转录控制和其他一些重要的细胞进程。本实验利用PCR技术从日本血吸虫18d童虫中首次扩增到蛋白酶体α2亚基基因(GenBank Accession No.AY813725),序列分析表明该基因的开放阅读框(ORF)含708bp,编码235个氨基酸,理论分子量25.84kDa。同源性分析结果显示,该基因为日本血吸虫蛋白酶体α2亚基,命名为SjPSMA2。实时定量PCR分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d和42d虫体中都有表达,7d和23d虫体表达量低于其他几个时期。构建了该基因的原核表达质粒pET28a(+)-SjPSMA2,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别,并且能检测到天然状态下该蛋白的存在。应用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,诱导产生了较高的特异性抗体水平及12.33%的减虫率和35.23%的肝脏减卵率。SjPSMA2基因及其表达产物的获得,为探索蛋白酶体在血吸虫生长发育中的作用提供了重要基础。

分类号： R392

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