环形泰勒虫TRAP-A蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建与鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 田占成
作者: 田占成;独军政;高闪电;杜晓悦;于瑞明;刘光远;罗建勋;殷宏
作者机构:
关键词: 酵母双杂交系统;环形泰勒虫;TRAP-A蛋白;自激活;细胞毒性
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2018 年 01 期
页码: 60-65
收录情况: 北大核心
摘要: 为了筛选出环形泰勒虫TRAP蛋白在虫体入侵媒介蜱唾液腺过程中相互作用蜱源蛋白,构建了能够用于酵母双杂交筛选系统的重组诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A。本研究以环形泰勒虫裂殖体为材料,根据环形泰勒虫TRAP-A结构域的基因序列设计引物,经过PCR扩增获得576 bp的基因片段,将其连接到线性化载体pGBKT7上。经双酶切鉴定和序列分析以及重组诱饵质粒在酵母双杂交系统中的自激活、细胞毒性及其表达情况检测,结果显示,本研究成功构建了酵母双杂交重组诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A,构建的诱饵质粒对Y2HGold酵母菌无自激活活性和细胞毒性,且构建的诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A可以在Y2HGold酵母菌内正确表达。表明所构建的诱饵质粒pGBKT7-TRAP-A可以用于筛选小亚璃眼蜱唾液腺酵母双杂交c DNA文库,获得可能与环形泰勒虫TRAP-A蛋白相互作用的蜱源蛋白。
分类号: S852.72
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