牛羊水间充质干细胞对小鼠酒精性肝病的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 纪洪兵

作者： 纪洪兵;宋哈楠;赵诗宇;张涛;关伟军

作者机构：

关键词： 羊水间充质干细胞;酒精性肝病;缺氧诱导因子-1α;异种移植

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 2905-2914

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 试验旨在分离培养牛羊水间充质干细胞（AF-MSCs）,并研究其对酒精性肝病（ALD）小鼠治疗效果以及对肝组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）及Toll样受体4（TLR4）mRNA表达的影响。从4～5月龄雌性胎牛羊水中获取AF-MSCs,进行RT-PCR、免疫荧光及诱导成脂鉴定。将48只ICR小鼠（雄性）随机分为4组:空白对照组（BC组）、模型对照组（MC组）、AF-MSCs组（MC+AF-MSCs组）和水飞蓟宾胶囊（SC）组（MC+SC组）,每组12只。除BC组灌胃0.2 mL生理盐水,其余各组均灌胃56度红星二锅头(5 g·kg -1,2次·d -1),连续4周;第29天MC+AF-MSCs组进行肝外注射Dil标记的AF-MSCs(5×106个·mL -1),MC+SC组分2次灌胃SC 2.4 mg（溶于56度红星二锅头）;试验结束后,测定小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和甘油三酯（TG）活性。HE染色、免疫组化法观察造模情况,Dil示踪AF-MSCs在肝内定植分布;qRT-PCR法检测HIF-1α、VEGF及TLR4基因表达情况。RT-PCR、免疫荧光结果表明,分离得到牛AF-MSCs,且有诱导成脂分化能力。血清学结果显示,MC组ALT、AST和TG活性极显著高于BC组（P<0.01）。组织病理切片显示,MC组肝组织中出现脂肪性变、炎性细胞浸润及肝血窦充血等病理性变化,说明56度红星二锅头成功复制ALD小鼠模型;与MC+SC组相比,MC+AF-MSCs组ALT、AST活性显著降低（P<0.01）,肝组织中脂肪性变减轻,肝血窦未见充血,说明AF-MSCs对肝功能的改善比SC效果显著;qRT-PCR结果显示,MC+AF-MSCs组下调HIF-1α、VEGF、TLR4基因的表达量较MC+SC组显著（P<0.01）,说明AF-MSCs参与HIF-1α/VEGF信号通路的调控,抑制TLR4表达的效果优于SC;细胞示踪术证明,AF-MSCs定植在病变部位并趋化更多AF-MSCs向炎症部位迁移参与肝组织的修复。综上,本研究成功分离得到牛AF-MSCs,其能够参与调节氧化应激、血管生成及抑制炎性因子的释放,且改善ALD的效果优于SC。

分类号： S856.4

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