文献类型： 中文期刊
第一作者： 林裕胜
作者： 林裕胜;李莎莎;江锦秀;张靖鹏;游伟;胡奇林
作者机构：
关键词： 绵羊肺炎支原体;丝状支原体山羊亚种;TaqMan探针荧光定量PCR
期刊名称： 农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2019 年 005 期
页码： 943-950
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Mo)和丝状支原体山羊亚种(M. mycoides subsp.capri, Mmc)是引起羊支原体性肺炎(M. pneumonia of sheep and goats, MPSG)的主要病原.为了快速鉴别引起MPSG的主要病原,建立一种可以同时检测Mo和Mmc的双重TaqMan探针荧光定量PCR (Realtime fluorescence quantitative PCR, q RT-PCR)检测方法.根据Mo p113序列和Mmc MLC1770(hypothetical protein gene)序列,利用Beacon Designer 7.9结合NCBI Blast软件分析,分别设计出针对Mo和Mmc的特异性引物和探针.通过对引物浓度、探针浓度和退火温度等反应条件的优化,建立了双重TaqMan探针qRT-PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了验证.结果表明,建立的双重TaqMan探针qRT-PCR的标准曲线相关系数R2分别为0.998和0.999,扩增效率分别为94.8%和97.0%;该方法对其他羊常见病原均无扩增信号,证明该方法具有良好的特异性;该方法对Mo和Mmc的最低检测限均为100 copies/μL,敏感性是常规PCR的100倍;组内和组间变异系数都低于2%,说明重复性好.应用该方法对福建省内收集的187例临床样品进行检测,结果显示,Mo的阳性率为47.6%(89/187),Mmc的阳性率为11.8%(22/187),两种病原体混合感染阳性率为10.2%(19/187).以上数据结果表明,本研究建立的方法可用于临床上Mo和Mmc的准确、快速检测.本研究为Mo和Mmc的快速检测及流行病学提供了技术支撑.
分类号： S852.62
- 相关文献
[1]绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种和山羊支原体山羊肺炎亚种多重PCR检测方法的建立. 林裕胜,江锦秀,江斌,游伟,胡奇林. 2018
[2]羊传染性胸膜肺炎的诊断及治疗探讨. 张义双,金振华,王丽坤,张国华,张备,兰世捷,苗艳,史同瑞. 2022
[3]应用双重PCR方法检测羊支原体肺炎病原. 储岳峰,高鹏程,赵萍,贺英,郭晗,逯忠新,赵海燕. 2009
[4]牛传染性鼻气管炎gB基因TaqMan探针及SYBR Green 1荧光定量PCR方法的建立与比较. 张喜喜,许健,李永清,周双海. 2017
[5]青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查. 韩赟,郭晗,逯忠新. 2010
[6]丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740生物信息学分析. 张靖鹏,江锦秀,林裕胜,游伟,胡奇林. 2018
[7]丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的克隆表达和免疫原性分析. 张靖鹏,江锦秀,林裕胜,游伟,胡奇林. 2019
[8]丝状支原体山羊亚种抗体间接血凝检测方法的建立及应用. 储岳峰,逯忠新,赵萍,高鹏程,贺英,石琴. 2007
[9]丝状支原体山羊亚种SYBR Green ⅠqRT-PCR快速检测方法的建立. 林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,胡奇林. 2017
[10]青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查. 韩赟,郭晗,逯忠新. 2010
[11]一株致病性山羊支原体山羊肺炎亚种支原体的分离. 辛九庆,张建华,胡守萍,李媛. 2006
[12]丝状支原体山羊亚种对山羊的致病性观察. 陈芙,袁婷,郝华芳,储岳峰,颜新敏,王鹏雁. 2021
[13]青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查. 韩赟,郭晗,逯忠新. 2010
[14]丝状支原体山羊亚种最佳培养基的筛选. 赵萍,储岳峰,高鹏程,贺英,逯忠新. 2008
[15]丝状支原体山羊亚种FJ-GT株的分离和鉴定. 江锦秀,林裕胜,游伟,江斌,胡奇林. 2016
[16]丝状支原体山羊亚种FJ-GT株的分离和鉴定简. 江锦秀,林裕胜,游伟,江斌,胡奇林. 2016
[17]绵羊肺炎支原体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立. 林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,胡奇林. 2018
[18]绵羊肺炎支原体和山羊伪结核棒状杆菌双重PCR检测方法的建立及应用. 黄丽丽,林裕胜,肖义军,胡奇林. 2020
[19]福清市福清山羊绵羊肺炎支原体血清学调查. 郭慧瑜,林裕胜,毛坤明,胡奇林. 2019
[20]绵羊肺炎支原体感染的诊断和防治技术研究进展. 江锦秀,林裕胜,张靖鹏,游伟,黄丽丽,胡奇林. 2019
作者其他论文 更多>>
-
龙牧茶秣食豆区域试验及栽培技术要点
作者：李莎莎;杨曌;柴华;王晓龙;徐艳霞;吴玥;高海娟;王锐
关键词：龙牧茶秣食豆;区域试验;草产量;品质
-
干旱胁迫对苜蓿种子萌发的影响
作者：王晓龙;杨曌;来永才;柴华;李莎莎;徐艳霞;吴玥;王建丽
关键词：苜蓿;萌发期;抗旱性;隶属函数法
-
黑龙江西部春播苜蓿苗期杂草化学防除研究
作者：李莎莎;杨曌;柴华;王晓龙;徐艳霞;吴玥
关键词：苜蓿;杂草;除草剂;安全性;防除效果
-
简析我国草原生态环境的保护与修复
作者：孙蕊;刘泽东;高海娟;王若丁;李伟;董佳强;李莎莎
关键词：草原生态;现存问题;保护与修复;治理措施
-
SSR分子标记在玉米研究中的应用
作者：王若丁;钟鹏;王建丽;高海娟;孙蕊;李伟;徐艳霞;杨曌;李莎莎;王晓龙;刘丽
关键词：SSR;分子标记;玉米;遗传多样性
-
鸽微RNA病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
作者：张靖鹏;陈翠腾;林琳;付环茹;李兆龙;江斌;黄瑜;万春和
关键词：信鸽;鸽微RNA病毒;3C基因;序列分析;实时荧光定量RT-PCR方法
-
不同燕麦品种全株矿物质元素含量及营养成分分析
作者：柴华;杨曌;李莎莎;王晓龙;徐艳霞;吴玥;陈金利
关键词：燕麦品种;矿物质元素;营养成分
