猪流感病毒血凝素基因原核表达及其在间接ELISA中的初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈艳

作者： 陈艳;乔传玲;丁选亚;杨焕良;辛晓光;韩庆功;陈化兰

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;HA基因;原核表达

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2008 年 40 卷 11 期

页码： 10-13

收录情况： 北大核心

摘要： 利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)血凝素(HA)基因,克隆于pMD18-T载体进行测序。以pMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF),克隆到表达载体pET32a中,经双酶切、测序及PCR鉴定得到阳性重组表达质粒pET-HA,将质粒转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,经终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,HA蛋白获得了高效表达,经Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫学活性,在间接ELISA中的初步应用表明具有良好的抗原反应性。本研究为以重组HA蛋白为抗原建立H1亚型猪流感抗体的ELISA检测方法奠定了基础。

分类号： S852.65

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