口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨彬

作者： 杨彬;刘在新;胡永浩;谢庆阁

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;结构蛋白;VP1基因;克隆;表达

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2003 年 33 卷 03 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用RT PCR技术 ,用包容口蹄疫病毒完整VP1基因的引物从口蹄疫分离株 (China/99 2 )中扩增得到一约 75 0bp的DNA片段 ,克隆后 ,经对该片段的核苷酸序列进行测序和同源性比较 ,显示其与国外同源参考序列 (O1K/66)的同源性为 80 .44% ,与国内同型参考株 (HB/WH/99)的核苷酸序列的同源性达 99.0 6%。随后以重组质粒pGEM VP1为模板 ,用特异性表达引物扩增得到目的基因VP1 (65 0bp) ,对目的基因和表达载体 pGEX 4T 1分别以相同的限制性内切酶酶切后构建成重组表达载体 ,转化宿主菌BL2 1 (DE3 )后得到重组质粒pGEX VP1 ,经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序证明目的基因正确插入到表达载体。用IPTG诱导VP1基因的表达 ,收集不同时间的菌液进行SDS PAGE电泳、Western blotting分析检测。结果表明 ,结构蛋白VP1基因可在大肠埃希氏菌中表达 ,表达产物的分子量约为 5 3ku ,并能被口蹄疫阳性血清所识别。经薄层扫描分析 ,表达蛋白约占菌体蛋白总量的 2 0 .0 0 %。证明口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因可在大肠埃希氏菌中高效表达 ,且表达产物有一定的生物学活性

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]口蹄疫病毒OH株结构蛋白基因VP1的克隆与表达. 龚真莉,刘湘涛,尚佑军,田宏,吴锦艳,尹双辉,陈国栋. 2006

[2]FMDVvp1基因在豆科牧草百脉根中的转化与表达. 王宝琴,王小龙,张永光,潘丽,王文秀,董金杰. 2005

[3]FMDV vp1基因在豆科牧草百脉根中的转化与表达. 王宝琴,王小龙,张永光,潘丽,王文秀,董金杰. 2005

[4]O型口蹄疫病毒VP1基因的克隆及原核表达载体构建. 凌连军,张培君,李永清,龚玉梅. 2006

[5]口蹄疫病毒vp1基因的克隆与植物双元表达载体的构建. 王宝琴,王小龙,张永光,潘丽,王文秀. 2007

[6]三株口蹄疫病毒的克隆和基因型鉴定. 相磊,梁之昶,章振华,王学文,胡国良,徐福洲,石岗,陈小玲. 2007

[7]禽脑脊髓炎病毒VP1基因的克隆及表达. 葛俊伟,关云涛,王云峰,刘怀然,李昌文,杨增岐,曲连东,陈洪岩. 2005

[8]鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建. 赵瑞宏,张丹俊,潘孝成,程宝艳,胡晓苗. 2010

[9]鸡贫血病毒VP1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达. 黄冬艳,杨兵,齐欣,陈小玲,徐福洲. 2006

[10]家蚕浓核病毒(镇江)株主要结构蛋白基因的克隆及表达. 许光治,张志芳,覃光星,黄可威,郭锡杰. 2004

[11]口蹄疫病毒非结构蛋白3AB、3A基因的克隆与原核表达. 张先锋,易忠,魏玉荣,胡尔玛西,符子华. 2010

[12]口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因的克隆与原核表达. 张先锋,易忠,魏玉荣,符子华,胡尔玛西. 2010

[13]口蹄疫病毒非结构蛋白3B真核表达载体的构建及表达. 尤永进,葛艳,陈波,饶忠,徐泉兴,朱彩珠,张强,卢永干. 2003

[14]口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因的克隆及3AB基因的原核表达. 曹轶梅,刘在新,卢曾军,胡永浩,常惠芸,谢庆阁. 2004

[15]口蹄疫病素3A基因在大肠杆菌中的高效表达. 薛青红,刘湘涛,张彦明,韩雪清,谢庆阁. 2002

[16]口蹄疫病毒3A基因在大肠杆菌中的高效表达. 薛青红,刘湘涛,张彦明,韩雪清,谢庆阁. 2002

[17]口蹄疫病毒非结构蛋白3abc基因的克隆与表达. 尤永进,朱彩珠,葛艳,陈波,张强,饶忠,徐泉兴,卢永干. 2003

[18]Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因表达及其抗体检测ELISA方法的建立. 陈宗艳,李传峰,刘光清. 2010

[19]O型FMDVVP1基因的表达鉴定及其多克隆抗体的制备. 任宪刚,薛飞,朱远茂,冯军科,史鸿飞,高欲燃. 2009

[20]表达FMDVAsia1VP1基因重组BHV-1的构建. 朱远茂,高欲燃,于作,董秀梅,吕闯,薛飞. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序