猪肺炎支原体和猪鼻支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 武昱孜

作者： 武昱孜;熊祺琰;刘蓓蓓;张珍珍;王佳;华利忠;韦艳娜;邵国青

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;猪鼻支原体;双重荧光定量PCR

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2017 年 08 期

页码： 1491-1498

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立同时检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体的双重荧光定量PCR方法。根据猪肺炎支原体P97序列和猪鼻支原体P37序列的特异性引物,分别标记FAM和Texas Red荧光报告基团的2条TaqMan探针,建立和优化双重实时荧光定量PCR反应条件和体系,同时检测其敏感性、特异性和重复性。建立的双重荧光定量PCR对猪肺炎支原体和猪鼻支原体的最低检测值均为10copies·μL-1;与猪源致病菌、病毒和其他常见细菌均无交叉反应;各浓度标准品的Ct值变异系数小于5%,重复性好。检测72份临床样本,其中猪肺炎支原体的肺阳性率为80%,鼻拭子阳性率22%,支气管肺泡灌洗液阳性率58.33%;猪鼻支原体的肺阳性率为40%,鼻拭子阳性率66%,支气管肺泡灌洗液阳性率41.67%。建立的双重荧光定量PCR方法比普通PCR更加敏感,实用性强,可用于临床样品的检测。该方法能同时快速和定量地检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体,在短时间内获得样品的多个信息,快速地解决了多次检测所需的时间以及经济消耗,为猪肺炎支原体和猪鼻支原体的监测和防控提供了新型、可靠的检测技术。

分类号： S858.28

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