H3N2亚型猪流感病毒实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陈艳

作者: 陈艳;张春明;乔传玲;杨焕良;张飞;吴运谱;辛晓光;陈化兰

作者机构:

关键词: 猪流感病毒;H3N2亚型;Taq Man MGB探针;实时荧光定量PCR

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2009 年 10 期

页码: 894-899

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因保守序列,分别设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光定量PCR技术检测SIV。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD18-H3HA、pMD18-N2NA标准品绘制标准曲线,其相关系数分别为0.99015(H3HA)和0.99947(N2NA)。检测结果显示,该方法的敏感性可达100 copies/μL,除H3N2亚型SIV外,对H1亚型、H9亚型SIV以及猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪瘟病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒和猪2型圆环病毒的检测均为阴性,应用该方法对实验室感染样品进行检测,其结果与病毒分离结果的符合率为95.83%。表明,该方法特异性强、重复性好,有望成为H3N2亚型SIV的一种特异、敏感、快速的定量检测方法。

分类号: S852.659.5

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