文献类型： 中文期刊
第一作者： 王锦明
作者： 王锦明;杨吉飞;李安岩;刘爱红;任巧云;马米玲;刘志杰;李有全;赵帅阳;张浩浩;殷宏;罗建勋;关贵全
作者机构：
关键词： 莫氏巴贝斯虫;RACE;克隆;表达;多克隆抗体
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2013 年 09 期
页码： 900-906
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 利用末端快速扩增技术从莫氏巴贝斯虫cDNA中扩增actin,aldolase和trap基因的5′和3′末端,经过序列装配后将获得的全序列插入pGEX-4T-1原核表达载体,将构建的原核表达载体转化至BL21(DE3)pLysS中,经IPTG诱导、表达后,将纯化的融合蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,并用ELISA和Western-blot测定抗体的效价和反应性。结果表明,获得的actin,aldolase和trap基因的全长分别为1 110、1 199和2 254bp,开放阅读框长度分别为1 005、1 074和2 100bp。制备的多克隆抗体具有良好的特异性。为筛选巴贝斯虫病疫苗、诊断用抗原和药物靶位,以及研究巴贝斯虫入侵宿主细胞的分子机制奠定了基础。
分类号： S852.723
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