基因Ⅶ型新城疫病毒融合前构象F蛋白的表达及结构分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈林娜

作者： 陈林娜;孙军峰;李乐;师乾凯;邸涛;刘添仪;赵冉;张春玮;韩宗玺;刘胜旺

作者机构：

关键词： 新城疫病毒;基因Ⅶ型;F蛋白;融合前构象

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 004 期

页码： 475-482

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目前,新城疫病毒（NDV）融合蛋白（F）的融合前构象是未知的,为获得具有融合前构象的NDV F蛋白,本研究对基因Ⅶ型NDV CK/CH/LHLJ/1/06株的F基因胞外区编码序列进行了修饰和密码子优化,将其克隆至真核表达载体中构建获得了重组质粒pCAG-optiF。通过SWISS-MODEL网站对蛋白结构进行预测,结果显示,质粒pCAG-optiF编码的蛋白能够形成与人呼吸道合胞体病毒F蛋白融合前构象相似的结构。将质粒pCAG-optiF转染至鸡源细胞LMH中,通过间接免疫荧光试验证实构建的蛋白在鸡源细胞中成功表达。将质粒p CAG-optiF转染悬浮培养的Expi293F细胞,表达并纯化获得重组蛋白roptiF。SDS-PAGE电泳结果显示获得了与预期大小相符的蛋白。Western-blotting结果显示,表达的roptiF蛋白能够与NDV CK/CH/LHLJ/1/06株的抗血清反应。进一步通过负染色电子显微镜观察roptiF蛋白结构,结果显示,roptiF蛋白具有典型的F蛋白融合前构象的结构特征。本研究成功获得了具有融合前构象的基因Ⅶ型NDV F蛋白,并且该蛋白能够与抗NDV的血清反应,本研究结果为研制新型NDV疫苗奠定了基础。

分类号： S852.65

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