口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因重组杆状病毒的构建与表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 马江涛

作者: 马江涛;卢曾军;曹轶梅;郭慧琛;郭建宏;祝秀梅;刘在新;杨孝朴

作者机构:

关键词: 口蹄疫病毒;3ABC基因;杆状病毒;Sf9细胞

期刊名称: 甘肃农业大学学报

ISSN: 1003-4315

年卷期: 2007 年 42 卷 04 期

页码: 11-16

收录情况: CSCD

摘要: 通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用SalI和NcoI双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状病毒骨架Bac-N-Blue共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染Sf9昆虫细胞,通过间接ELISA方法,检测细胞培养基上清液中表达的口蹄疫病毒抗原.结果表明,口蹄疫病毒基因片段3ABC正确克隆到杆状病毒载体上,重组病毒可在昆虫细胞中表达目的蛋白.

分类号: S852.65

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