鸡MHCⅠα和β2m链基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 戴银

作者: 戴银;胡晓苗;赵瑞宏;侯宏艳;沈学怀;潘孝成;周学利;张丹俊

作者机构:

关键词: 鸡MHCⅠα基因;鸡MHCⅠβ2m链基因;真核表达载体;293T细胞

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2016 年 43 卷 08 期

页码: 1938-1943

收录情况: 北大核心

摘要: 为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类(major histocompatibility complex,MHCⅠ)分子在免疫应答中的作用机制,试验经PCR克隆获得MHCⅠα和β_2m链基因,随后插入带有荧光标签蛋白的真核表达载体,成功构建了重组质粒pEGFP-MHCⅠα和pmCherry-MHCⅠβ_2m,并通过脂质体法转染293T真核表达细胞。荧光显微镜观察可见,MHCⅠα和β_2m分子主要分布于真核细胞的内膜系统,改变了与之融合的荧光蛋白在细胞内的定位。此外,Western blotting检测可见大小约68.3和41.3ku的目的蛋白反应带,表明重组质粒能够在293T细胞中顺利表达,且表达蛋白与鸡MHCⅠ类分子的相应抗体可发生特异性结合反应,具有良好的免疫学活性。

分类号: Q78

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