禽腺病毒4型鞭毛重组蛋白的原核表达及其免疫效果研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘超
作者: 刘超;侯磊;韦莉;王菁;全荣;朱珊珊;李子璇;齐宾宾;王利佳;姜海军;王丹;刘爵
作者机构:
关键词: 禽腺病毒4型;鞭毛基因;fiber2基因;原核表达;免疫保护
期刊名称: 中国兽医杂志
ISSN: 0529-6005
年卷期: 2017 年 05 期
页码: 15-19
收录情况: 北大核心
摘要: 为研究禽腺病毒4型重组鞭毛-fiber2蛋白免疫保护性,将鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因与禽腺病毒4型的fiber2基因融合,再将融合基因和单独的fiber2基因分别克隆到原核表达载体p ET-28a,后将构建的p ET-28a-flagellin-fiber2和p ET-28a-fiber2重组载体分别转入大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物,再将表达产物纯化后免疫21日龄SPF鸡;结果表明,重组菌在37℃培养条件下1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h可表达最多的可溶性重组蛋白,Western Blot分析表明,所表达的重组蛋白均能与禽腺病毒血清4型感染阳性血清发生特异性反应,说明所表达蛋白具有良好反应原性,动物试验表明,表达的两种目的蛋白能为鸡提供一定保护力,且低剂量的重组鞭毛-fiber2蛋白产生较好的免疫保护效果。
分类号: S852.65
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