桑树皱叶病毒外壳蛋白基因的原核表达和抗体制备及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 卢全有

作者： 卢全有;张建平;孙鑫;杨磊

作者机构：

关键词： 桑树皱叶病毒;外壳蛋白基因;稀有密码子;原核表达;抗血清

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2017 年 03 期

页码： 388-394

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 桑树皱叶病毒(mulberry crinkle leaf virus,MCLV)是近年从感病桑树中分离鉴定的一种新的桑树病毒,该病毒属于双生病毒科。由于MCLV外壳蛋白基因(cp)序列中含有较多大肠埃希菌(Escherichia mori)BL21(DE3)的稀有密码子而限制了其在大肠埃希菌中的表达。通过人工合成DNA的方法对MCLV cp基因序列进行优化,将其中40个大肠埃希菌稀有密码子变换成同义偏爱密码子,构建优化后的MCLV cp基因的原核表达载体p GEX4T-MCLV CP并转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,经0.1 mmol/L IPTG诱导及SDS-PAGE电泳鉴定,实现了融合蛋白GST-MCLV CP在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达。通过SDS-PAGE纯化后切胶回收原核表达的融合蛋白GST-MCLV CP,以其为抗原免疫新西兰大白兔制备MCLV CP的多克隆抗体,经间接ELISA法测定该抗血清的效价为1∶4 096,Western blot检测其能与MCLV发生特异性反应。用制备的抗血清对MCLV感染阳性的桑叶样品进行间接ELISA检测,其检出率仅为25%,但将桑叶样品的粗汁液煮沸处理后能显著提高MCLV的检出率,检出率达83.3%。

分类号： S888.71

  • 相关文献

[1]烟草环斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清的制备. 朱常香,宋云枝,王玫玫,王秀芳,温孚江. 2005

[2]甘薯脉花叶病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备. 张业辉,秦艳红,乔奇,张德胜,田雨婷,王永江,张振臣. 2011

[3]瓜类褪绿黄化病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备. 施艳,袁媛,孙虎,古勤生,刘珊珊,王振跃. 2013

[4]甘薯潜隐病毒外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备. 黄玉娜,张振臣. 2007

[5]桑花叶卷叶病相关病毒外壳蛋白基因的原核表达与免疫检测. 卢全有,吴祖建,夏志松,谢联辉. 2015

[6]甘薯病毒G(SPVG)外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备. 付振艳,张振臣. 2007

[7]苹果坏死花叶病毒CP基因原核表达及其抗血清制备. 邢飞,王红清,李世访. 2024

[8]齿兰环斑病毒外壳蛋白基因的表达及其表达产物抗血清的制备. 潘俊松,刘志昕,康由发,郑学勤. 1999

[9]拟南芥SHORT-ROOT基因稀有密码子分析及其在原核细胞中的表达和纯化. 孙验玲,郑玲,穆春华,于倩倩,何春梅,耿骁渝,郑红霞,刘霞. 2016

[10]甘薯卷叶病毒江苏分离物基因组全长序列测定及其外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达. 乔贞贞,秦艳红,乔奇,张德胜,田雨婷,高洁,张振臣. 2012

[11]葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达. 刘晓,席德慧,袁澍,蒋彧,杨辉,杜俊波,张中伟,陈克玲,林宏辉. 2008

[12]鹅细小病毒VP基因片段的原核表达及抗血清的制备. 匬昱昊,王静,王懂帅,韩宗玺,刘胜旺,冉多良,孔宪刚. 2006

[13]鸡补体C3d抗血清的制备与应用. 闫敏鑫,黄秀芬,任慧英,刘杉杉,姜良,李永清. 2015

[14]黄瓜S期激酶相关蛋白Skp1的原核表达及其多克隆抗体的制备. 孙新艳,魏莹,韩晓玉,王振跃,陈琳琳,燕照玲,施艳. 2017

[15]甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备. 秦艳红,乔奇,王爽,张德胜,王永江,田雨婷,张振臣. 2018

[16]禽流感病毒PB2亚单位抗血清的制备. 葛叶,邓国华,李雪平,陈化兰. 2010

[17]番茄环纹斑点病毒非结构蛋白NSs的原核表达及多抗血清制备. 郑宽瑜,董家红,尹跃艳,方琦,苏晓霞,张仲凯. 2015

[18]瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备. 施艳,王振跃,袁媛,刘珊珊,孙虎,古勤生. 2013

[19]马铃薯卷叶病毒缺失突变CP基因的原核表达及抗血清的制备. 隋炯明,何心凤,郭真,李广存,王晶珊,郭宝太. 2012

[20]大麦黄矮病毒GPV株系ORF4基因在大肠杆菌中的表达及特异抗血清的制备. 吴茂森,王振跃,张文蔚,成卓敏. 2004

作者其他论文 更多>>

微信小程序