文献类型： 中文期刊
第一作者： 岑双庆
作者： 岑双庆;李有全;陈泽;张晓;李安岩;何海宁;刘志杰;杨吉飞;关贵全;牛庆丽;刘爱红;任巧云;罗建勋;殷宏
作者机构：
关键词： 环形泰勒虫;微线体-棒状体蛋白;原核表达;Western-blot
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2014 年 06 期
页码： 599-604
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了解环形泰勒虫微线体-棒状体蛋白的生物学特性,通过生物信息学分析,选取环形泰勒虫微线体-棒状体蛋白特异性和抗原性最高的一段开放阅读框进行RT-PCR扩增,将所获基因片段连接到原核表达载体pGEX-4T-1中进行表达,将表达产物纯化后免疫家兔制备该蛋白的多克隆抗体。通过SDS-PAGE和Western-blot分析该基因的原核表达情况和表达产物的反应原性。生物信息学分析发现,该蛋白第470~650位氨基酸残基的特异性和抗原性最高。对诱导条件的摸索发现,在37℃、1.0mmol/L IPTG条件下诱导6h表达量最高,表达产物大小为43ku。Western-blot结果显示,该蛋白能被环形泰勒虫阳性的牛血清所识别,具有很好的反应原性。本研究制备的多克隆抗体为后期研究微线体-棒状体蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
分类号： S855.9
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