小麦农杆菌介导转基因植株的稳定获得和检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 叶兴国

作者： 叶兴国;Shirley Sato;徐惠君;杜丽璞;Tom Clemente

作者机构：

关键词： 小麦;农杆菌;转基因植株;单拷贝整合

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2001 年 34 卷 05 期

页码： 469-474+581-582

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以预培养 4 d的小麦幼胚愈伤组织为受体 ,L B培养基上激活培养 3 d或 AB培养基上激活培养 4 d,并在WCC培养基中重悬的 C5 8c1农杆菌菌系为供体 ,将含有目的基因、标记基因的 p PTN2 4 9、p PTN 2 5 4、p PTN2 70、p SIS-GFP等重组 DNA质粒转入了小麦 ,经在含 10～ 5 0 mg/ L geneticin( G4 18)、5 0 mg/ L cefotaxime、5 0 m g/ L vancomycin、5 0 m g/ L ticillicin选择培养基上多次选择 ,移栽前利用 npt EL ISA检测 ,移栽后利用叶片离体退绿、PCR和 South-ern blot 4种方法综合检测 ,共获得了 2 9株转基因植株 ,转化频率平均为 0 .82 %。在所获得的转基因植株中 ,单拷贝整合植株占 65 .5 2 %。研究结果还表明 ,不同基因型的转化效率显著不同 ,除了 Bobwhite外 ,笔者也从扬麦 10号获得了转基因植株 ;EL ISA测定值的高低与外源 DNA整合的拷贝数有一定关系 ;初步建立了农杆菌介导稳定转化小麦的技术体系。

分类号： S512.103.53

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