斑石鲷肝脏细胞系的建立与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张宏祥

作者： 张宏祥;李坤明;王娜;翟介明;陈松林

作者机构：

关键词： 斑石鲷;肝脏细胞系;原代培养;核型

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 360-368

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 鱼类细胞培养技术是一种被广泛应用于病毒学、环境毒理学、细胞生物学、基因组学以及遗传学等方面研究的重要研究手段。斑石鲷(Oplegnathus punctatus)是优良的海水养殖鱼类,在水产养殖产业中备受青睐。本研究通过组织块法,以斑石鲷肝脏组织为材料,建立了斑石鲷肝脏细胞系(O. punctatus liver cell line, OPL)。培养细胞系所用的培养基是在L-15基本培养基中添加了青链霉素混合液、胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和β-巯基乙醇(2-mercaptoethanol, 2-ME)所配成的完全培养基。培养出的OPL细胞主要由成纤维样细胞构成,生长分裂旺盛,成功传至30多代。比较不同培养基:L-15 (Leibovitz-15)、DMEM/F12 (Dulbecco's modified Eagle medium/Ham's F-12)、DMEM和MEM对OPL细胞生长的影响,结果表明,L-15培养基最适用OPL的培养。此外,检测了温度、FBS浓度、bFGF浓度对OPL细胞生长的影响。结果表明,OPL细胞在18～30℃能正常生长,24℃是最适生长温度;OPL细胞在0%～20%FBS浓度范围内,其生长速度随血清浓度的升高而增快;在培养基中添加bFGF可以提高细胞生长速度。核型分析显示,第20代OPL细胞显示为正常二倍体核型(2n=2sm+46t),但其比例仅为68%。通过脂质体转染法将pEGFP-N3质粒转入OPL细胞中,可表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)。用斑石鲷的线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome oxidase subunitⅠ, COⅠ)基因进行检测,确定该OPL细胞系来源于斑石鲷。OPL细胞系的建立将为斑石鲷致病性病毒的感染机制、细胞及基因的功能分析等研究提供实验材料。

分类号： S917.4

  • 相关文献

[1]半滑舌鳎肝脏细胞系的建立与鉴定. 任国诚,陈松林,沙珍霞. 2008

[2]斑石鲷形态性状对体质量影响的通径分析. 白晓慧,尤宏争,张韦,贾磊,王娜,罗璋. 2015

[3]斑石鲷(Oplegnathus punctatus)雌、雄鱼核型及Ag-NORs带型分析. 薛蕊,安皓,刘清华,肖志忠,王彦丰,李军. 2016

[4]硫酸铜对斑石鲷幼鱼的急性毒性及对眼点淀粉卵涡鞭虫的杀灭效果. 范超,史成银. 2016

[5]不同健康程度和抗生素氟苯尼考干预下斑石鲷肠道菌群的结构差异. 许燕,王印庚,张正,姜燕,廖梅杰,李彬,王凯,李文生. 2018

[6]斑石鲷低氧耐受能力及血液生理生化指标变化研究. 高云涛,高云红,李明月,赵侠,李文升,庞尊方,关长涛,贾玉东. 2022

[7]船载摇摆胁迫对斑石鲷血液生化指标的影响研究. 张宇雷,管崇武. 2017

[8]斑石鲷(Oplegnathus punctatus)游泳性能研究. 段勇杰,谢婷,高云涛,王枫林,李梦迪,关长涛,贾玉东. 2023

[9]斑石鲷陆海接力养殖初步研究. 王枫林,高云涛,高云红,李明月,张秉智,关长涛,贾玉东. 2022

[10]基于氨氮平衡的水产养殖换水率计算方法研究. 张宇雷,曹伟,蔡计强. 2016

[11]斑石鲷irf7基因克隆及其在病毒感染下的表达. 宋煜,李开敏,徐文腾,陈松林,王磊. 2023

[12]斑石鲷卵鞭虫病病原的分子鉴定与系统发育分析. 付泉洁,范超,谢国驷,叶仕根,史成银. 2017

[13]斑石鲷(Oplegnathus punctatus)、云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀*E.lanceolatus♂)、许氏平鮋(Sebastes schlegelii)游泳行为对比分析研究. 刘铠源,段勇杰,程浩,吕俊贤,谢婷,李娟,关长涛,贾玉东. 2024

[14]斑石鲷性腺发育的组织学观察与初步分析. 赵玉柱,陈张帆,马腾,李明,吴垚磊,王清滨,陈松林. 2021

[15]大型围栏养殖模式下2种规格斑石鲷耐高温研究. 李明月,高云红,高云涛,刘成磊,赵侠,关长涛,贾玉东. 2022

[16]2种驱鲨方式对海水水质及海水鱼类急性毒性影响. 刘李娜,王锦锦,廖梅杰,王世锋,李彬,荣小军,王印庚,郑童潇. 2023

[17]中国养殖斑石鲷(Oplegnathus puncatus)上皮囊肿病的发现及显微观察. 范超,史成银,刘江春. 2017

[18]船载振动胁迫对斑石鲷影响实验研究. 张宇雷,管崇武. 2017

[19]斑石鲷irf3基因鉴定及其在虹彩病毒感染下的表达模式. 李开敏,王磊,巩志宏,王清滨,李华,杨桂文,黄友华,陈松林. 2024

[20]陆海转运应激对两种不同养殖模式下斑石鲷生理功能的影响. 谢婷,王枫林,段勇杰,程浩,关长涛,闫冬春,贾玉东. 2025

作者其他论文 更多>>

微信小程序