棉花半乳糖基转移酶基因GhGalT1启动子的克隆及表达分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 秦丽霞
作者: 秦丽霞;李静;张换样;李盛;竹梦婕;焦改丽;吴慎杰
作者机构:
关键词: 棉花;糖基转移酶;启动子;顺式作用元件;GUS组织化学染色;GUS定量分析
期刊名称: 作物学报
ISSN: 0496-3490
年卷期: 2018 年 02 期
页码: 218-226
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 糖基转移酶(glycosytransferase,GT)是催化活化的供体糖基转移到特异受体生成糖苷键的酶类,在应答多种生物和非生物胁迫中起重要作用。本研究利用PCR技术从陆地棉品种Coker 312基因组中分离克隆了GhGalT1基因的启动子,序列长度为539 bp,命名为pGhGalT1。启动子分析软件Plant CARE分析表明pGhGalT1含有CAAT-box、TATA-box核心元件,以及响应干旱、热、脱水、防御与胁迫应答的顺式作用元件MBS、HSE、MYCCONSE、TC-rich repeats和CGTCA-motif等。因此将pGhGalT1构建到启动子检测载体p BI101-GUS上,形成p BI101-pGhGalT1-GUS融合表达载体,以检测其启动子活性。通过农杆菌介导的浸花法转化拟南芥,经卡那霉素抗性筛选及PCR检测成功获得阳性转基因植株。对T3代转基因拟南芥进行组织化学染色分析显示该启动子主要在生长5~15 d的幼苗主根及侧根根尖表达,在子叶及莲座叶边缘也有微弱表达。非生物胁迫和激素处理后的组织化学染色、GUS酶活性及GUS基因定量分析结果显示GhGalT1基因的启动子受盐、渗透胁迫和激素(6-BA、MeJA、BL)的诱导,该结果为合理选用启动子改良作物提供理论依据。
分类号: Q943.2`S562
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