鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物的生物学特性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张名岳

作者： 张名岳;周财源;韩宗玺;邵昙昊;刘胜旺;马得莹

作者机构：

关键词： 鹅AvBD3;融合蛋白;抗菌活性;盐浓度;溶血活性;酸碱度

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2011 年 27 卷 12 期

页码： 1711-1721

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因,并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白,进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性,利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段,其cDNA片段大小为182 bp,编码60个氨基酸残基。经同源性分析发现鹅AvBD3氨基酸序列与鸡AvBD3氨基酸序列同源性最高,为100%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的BamHⅠ和SalⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-goose AvBD3。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鹅AvBD3蛋白在原核高效表达(分子量约31 kDa)。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性,结果显示,重组鹅AvBD3蛋白具有广谱的抗菌活性,对12种细菌,包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用。高盐离子浓度显著降低重组鹅AvBD3蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白的溶血活性极低,并对酸碱度具有较高的稳定性。

分类号： S835`Q78

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