应用环介导等温扩增技术快速检测单核细胞增生李斯特菌的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 唐梦君

作者： 唐梦君;高玉时;周生;张小燕;唐修君;蒲俊华;葛庆联

作者机构：

关键词： 单核细胞增生李斯特菌;环介导等温扩增技术;hlyA基因

期刊名称： 中国动物检疫

ISSN： 1005-944X

年卷期： 2010 年 27 卷 09 期

页码： 25-28

摘要： 目的建立环介导等温扩增技术快速检测单核细胞增生李斯特菌。方法根据单核细胞增生李斯特菌(LM)hlyA基因序列中的保守区域,采用在线引物设计软件Primer Explorer4.0进行设计,获得一套特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,对单核细胞增生李斯特菌hlyA基因进行LAMP扩增,并与常规PCR方法进行比较。结果建立的LAMP方法能成功扩增出梯形条带,LAMP检测单核细胞增生李斯特菌纯培养物和人工染菌的灵敏度为5.44×102cfu/mL,而对照PCR检测的灵敏度为5.44×104cfu/mL。对10株细菌进行LAMP扩增,仅单核细胞增生李斯特菌得到阳性结果。从DNA提取到报告结果,耗时仅1h。结论 LAMP检测单核细胞增生李斯特菌灵敏度高,特异性强,耗时短,方法简便,有望发展成为快速检测食品中单核细胞增生李斯特菌的有效手段。

分类号： R155.5

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