鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 吕炫
作者: 吕炫;张淼;胡增金;李佳明;张冲;朱英奇;魏娟文;吴琼;张瑞辰;夏伦志;王桂军
作者机构:
关键词: 鹅星状病毒;衣壳纤突蛋白VP27;多克隆抗体
期刊名称: 江苏农业学报
ISSN: 1000-4440
年卷期: 2021 年 002 期
页码: 412-417
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64 000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。
分类号: S852.65
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