来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄火清

作者： 黄火清;罗会颖;柏映国;王亚茹;姚斌

作者机构：

关键词： 高比活植酸酶;基因改造;毕赤酵母;高效表达

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2006 年 46 卷 06 期

页码： 945-950

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 柠檬酸杆菌(Citrobacterbraakii)来源的植酸酶是目前报道的比活最高的植酸酶。按照毕赤酵母(Pichiapastoris)对密码子的选择偏向性,对来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因AppA进行了密码子优化改造。改造后的基因AppA(m)按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9的α-因子信号肽编码序列3′端,通过电击转化得到重组转化子。通过PCR验证,AppA(m)已整合在酵母染色体上。SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,植酸酶得到了高效分泌表达,在5L发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到3·2mg/mL发酵液,发酵效价达到每毫升发酵液1·4×107IU以上,高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价。

分类号： Q786

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