环形泰勒虫裂殖体感染的牛淋巴细胞中galectin-1基因的原核表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李亚琼

作者： 李亚琼;李有全;韩元;李倩;徐春兰;秦鸽鸽;殷宏;蔡葵蒸

作者机构：

关键词： 牛;半乳糖凝集素1;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2015 年 05 期

页码： 497-502

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得重组牛半乳糖凝集素1(galectin-1),从被环形泰勒虫裂殖体感染的牛淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成第一链cDNA,利用RT-PCR扩增galectin-1基因。将目的片段连接到载体pET-30a(+)上,并转化入表达菌BL21(DE3)中,经PCR、酶切及测序验证正确后,进行IPTG诱导表达和His-NiResin蛋白纯化。SDS-PAGE结果表明,获得了约17ku的表达产物。Western-blot分析表明,表达产物与抗His标签的小鼠单克隆抗体、绵羊抗牛半乳糖凝集素1多克隆抗体均能发生反应。重组半乳糖凝集素1的多克隆抗体也可以较好地识别天然蛋白。本试验成功表达了牛半乳糖凝集素1,并制备了其多克隆抗体,为以后进行与半乳糖凝集素1相互作用蛋白的研究奠定了基础。

分类号： S852.7

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