表达猪圆环病毒2型Rep/Rep'蛋白的重组杆状病毒的构建及其鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘丹

作者： 刘丹;陆月华;吴洪丽;危艳武;唐青海;王一平;李胜斌;刘建波;魏萍;刘长明

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;Rep/Rep'蛋白;杆状病毒表达

期刊名称： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集

ISSN：

年卷期： 2012 年

页码： 5

收录情况： CSCD

摘要： 摘要猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1编码的Rep蛋白与病毒复制相关,其与转录中剪切所得的小Rep'蛋白是病毒复制所必须的。为了构建表达PCV2-Rep和Rep'蛋白的重组杆状病毒,采用PCR法从病毒感染细胞中扩增Rep和Rep'蛋白基因,并克隆到杆状病毒转移载体(pBlueBac4.5/V5-His-TOPO)。将重组质粒与线性化杆状病毒DNA共转染昆虫细胞(Sf-21),经同源重组和蚀斑筛选,获得2株高效表达PCV2-Rep和Rep'蛋白的重组杆状病毒。经3次克隆的重组毒株毒价达7.0×10~7和3.0×10~7pfu/mL。蛋白表达分析表明,PCV2-Rep和Rep'蛋白分子量为36.0...

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