抗微囊藻毒素单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋丽敏

作者： 宋丽敏;张维;陈明;林敏;潘家荣

作者机构：

关键词： 微囊藻毒素(MC);单链抗体;原核表达;ELISA

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2010 年 20 卷 03 期

页码： 327-330

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用RT-PCR方法从抗微囊藻毒素-LR(MC-LR)单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增出抗体的V_H和V_L基因,构建了抗MC-LR分子的单链抗体(scFv)基因。SDS-PAGE和Western blot分析结果显示,该单链抗体基因在大肠杆菌Origami 2中特异性表达出分子量约为30kD的融合蛋白。通过Ni-NTA金属亲和层析法对可溶性表达产物进行纯化,获得的目的蛋白浓度为0.115mg/mL。ELISA反应结果表明该单链抗体能与MC-LR特异性结合。此研究为制备多价高亲和力抗MC-LR抗体奠定了基础。

分类号： Q949.98

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