绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 田路路

作者： 田路路;孟庆玲;乔军;陈诚;刘田莉;卢海亭;张星星;贡莎莎;才学鹏;陈创夫

作者机构：

关键词： 绵羊肺炎支原体;抗原表位;多表位融合基因;表达

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2017 年 05 期

页码： 678-684

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MO EF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-32a(+)-MO-meAg1。将pET-32a(+)-MOmeAg1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后检测重组蛋白反应原性和免疫原性。SDSPAGE结果显示,MO-meAg1重组蛋白分子质量约34.5ku;Western blot分析结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性。小鼠免疫试验结果表明,重组蛋白MO-meAg1具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗血清其间接血凝效价可达1∶128以上。获得的多表位融合蛋白MO-meAg1为绵羊支原体肺炎的免疫学诊断及新型疫苗研究奠定基础。

分类号： S858.26

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