猪CD205分子CysR-FNⅡ截短基因的克隆表达及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高文昊

作者： 高文昊;杜露平;侯立婷;于晓明;陈瑾;冯秀丽;郑其升;程海卫

作者机构：

关键词： 猪;CD205;CysR-FNⅡ截短基因;原核表达;生物学活性

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN：

年卷期： 2022 年 005 期

页码： 1272-1277

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为克隆表达编码猪CD205分子的CysR-FNⅡ截短基因片段，并验证其生物学活性，提取了猪淋巴组织总RNA,并合成cDNA,利用PCR方法扩增编码猪CD205分子的CysR-FNⅡ截短基因，构建pET-32a-CysR-FNⅡ原核重组表达质粒，转化至大肠杆菌BL21,分别进行诱导表达与蛋白质纯化，利用制备的目的蛋白免疫小鼠获得多克隆抗体，经间接免疫荧光试验和流式细胞分析鉴定。SDS-PAGE与Western Blot鉴定结果显示，目的蛋白以可溶性形式表达，大小约4.0×10~4,与理论值一致。一次免疫后14 d抗体效价达1∶3 200。间接免疫荧光试验和流式分析结果显示，获得的多克隆抗体可与猪骨髓来源树突状细胞发生特异性结合。说明该重组表达蛋白质具有相应的生物学活性，可用于猪CD205抗原靶向研究。

分类号： S852.4

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