猪瘟RT-PCRELISA诊断方法的建立及其初步应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙世琪

作者: 孙世琪;郭慧琛;尚佑军;魏旭文;靳野;马军武;韩雪清;刘湘涛;谢庆阁

作者机构:

关键词: 猪瘟;RT-PCRELISA;分子诊断

期刊名称: 中国兽医科技

ISSN:

年卷期: 2003 年 09 期

页码: 4

收录情况: CSCD

摘要: 建立了检测CSFV的快速、敏感、特异的RTPCRELISA方法。在RTPCR过程中以地高辛标记的dUTP(DIGdUTP)标记PCR产物,用生物素标记的捕获探针在链亲和素包被微量板孔中杂交捕获PCR产物。该方法的敏感性较常规RTPCR方法高100倍,可检测出350μL1∶100(相当于3.5mg)的兔脾组织悬液中的C株CSFV,特异性强,避免了PCR过程中因污染导致的假阳性结果。通过对RTPCR和微量杂交系统的条件优化,该方法用于检测C株兔脾组织毒、细胞适应毒和野毒感染的猪组织毒样品,效果良好

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