长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谢俊仁

作者： 谢俊仁;刘光远;田占成;李知新;贾宁

作者机构：

关键词： 长角血蜱;cDNA表达文库;构建

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2007 年 42 卷 06 期

页码： 13-17

收录情况： CSCD

摘要： 为了克隆和研究具有免疫原性的长角血蜱基因,应用建库试剂盒成功构建了长角血蜱雌蜱唾液腺cD-NA表达文库.在无Rnase污染的环境下摘取半饱血长角血蜱雌蜱唾液腺,并从中提取RNA,进而纯化mRNA,利用oligo(dT)引物反转录合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并酶切,过柱分级分离后,将cD-NA分子定向连接到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体中.经体外包装转染E.coliERl647宿主菌,进行文库容量测定和扩增.以扩增文库的DNA为模板,利用载体通用引物检测cDNA文库中插入片断的大小和质量.经检测,所构建长角血蜱cDNA文库的基础库容量约为4.2×106pfu/mL,插入片段主要集中在300~2 000 bp之间,说明文库质量高、代表性强.

分类号： S852.7

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