口蹄疫病毒O／China／99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘丽

作者： 潘丽;张永光;王永录;王宝琴;王文秀;方玉珍;蒋守田;张维德;董金杰;吕建亮;谢庆阁

作者机构： 中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词： 口蹄疫病毒;O／China／99株;多基因植物;组成型表达载体;基因序列;可饲疫苗

期刊名称： 中国人兽共患病杂志

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2005 年 21 卷 10 期

页码： 841-844,905

收录情况： CSCD

摘要： 目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体。为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法，从pGEM／P12A质粒和pGEM／3C质粒中扩增P12A及部分2B基因（P12X）、3C基因，将获得的P12X与3C片段经Bam HI／SpeⅠ和SpeⅠ／SalⅠ双酶切后，与经Bam HI／SalⅠ双酶切后的pUC18质粒大片段连接，得到重组质粒pUC18／P12X3C，pUC18／P12X3C质粒经Bam HI／SalⅠ双酶切后的大片段与经同样双酶切的植物表达载体pBin438连接。转化子经酶切、PCR及测序鉴定后。获得包含FMDVO／China／99株P12X3C片段的植物组成型表达载体pBin438／P12x3C，最后通过三亲交配法，将表达载体pBin438／P12x3C导入农杆菌。结论成功构建FMDV多基因的植物组成型表达载体。

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