牛病毒性腹泻病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩猛立

作者： 韩猛立;黄新;钟发刚;唐思静

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;实时荧光定量RT-PCR;SYBR Green I

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2014 年 51 卷 02 期

页码： 333-339

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】在建立一种快速定量的用于检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的实时荧光定量RT-PCR检测方法。【方法】根据GenBank公布的BVDV 5'端非编码区(5'UTR)核苷酸序列,软件分析后设计特异性扩增引物,建立SYBR Green I实时荧光定量PCR方法。【结果】建立的方法只能检测到BVDV,而与猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛轮状病毒及牛冠状病毒没有交叉反应,具有高度的特异性;在102~108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.998,最低可检测下限可达到102copies/μL,具有灵敏度高的特点;不同情况下3次重复实验,变异系数均小于1.5%,具有重复性好的特点。【结果】成功建立了一种用于检测BVDV的实时荧光定量RT-PCR技术,并可用于临床样品的检测,适用于BVDV的快速诊断和流行病学调查。

分类号： S852.65

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