布氏杆菌L7/L12和OMP31基因克隆及其融合蛋白免疫原性研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 李海涛
作者: 李海涛;苗利光;张广雷;刘艳环;孙金霞
作者机构:
关键词: 布氏杆菌;基因重组;表达载体构建;融合蛋白
期刊名称: 2010中国鹿业进展
ISSN:
年卷期: 2010 年
页码: 7
收录情况: CSCD
摘要: 本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列,选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因,依此进行PCR扩增,利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组,克隆到已经构建好的表达载体上,经过PCR检测,限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,得到了正确的重组,并构建了PME290-SDLOmp高效表达载体,将构建好的表达载体转化绿脓杆菌(PAK/2pfs),通过培养得到了表达产物,对表达产物进行SDS-PAGE和WesternBlot鉴定,结果符合预期。用分子生物学软件DNASTAR7.1对重组蛋白进行了分析,结果显示该基因编码的蛋白具有很好的亲水性。经融合蛋白动物免疫试验,结果表明...
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