巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 白方方

作者： 白方方;武昱孜;靳蒙蒙;刘茂军;冯志新;熊祺琰;邵国青

作者机构：

关键词： 猪鼻支原体;巢式PCR;检测

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2013 年 33 卷 07 期

页码： 1007-1010

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能扩增出猪絮状支原体、猪滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体、胸膜肺炎放线杆菌、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒等病原体;敏感性试验表明,第1次PCR和第2次PCR的敏感度分别为3.01mg/L和3.01×10-4 mg/L。对41份临床样品肺组织的检测中,普通PCR和巢式PCR的检出率分别为29.3%(12/41)和82.9%(34/41)。结果表明,巢式PCR方法明显优于常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性,为猪鼻支原体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。

分类号： S858.28

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