利用正交设计优化桃SRAP-PCR反应体系
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张妤艳
作者: 张妤艳;马瑞娟;俞明亮;宋宏峰;许建兰;沈志军;蔡志翔
作者机构:
关键词: 桃;SRAP;正交设计;分子标记
期刊名称: 江西农业学报
ISSN: 1001-8581
年卷期: 2010 年 22 卷 08 期
页码: 26-28+31
摘要: 以桃基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTP、引物、模板5种因素4个水平对桃SRAP反应体系进行优化,建立了适合于桃的SRAP-PCR优化反应体系,该25μL反应体系:模板DNA50 ng,MgCl22.5 mmol/L,dNTP200μmol/L,上下引物各0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,以灭菌双蒸水补齐至25μL。PCR反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。
分类号: S662.1
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