牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat6融合基因的分子克隆及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 迟磊

作者： 迟磊;刘思国;王春来;宫强;赵昆;王勇;刘建东;云孟克;赵福广

作者机构：

关键词： 牛分枝杆菌;融合基因;重组表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2007 年 29 卷 08 期

页码： 588-590

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以牛分枝杆菌valleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增mpb64、ag85b和esat6 3个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)和基因重组技术获得融合基因mpb64-ag85b,将mpb64-ag85b和esat6串联到同一原核表达载体pET32a(+)中获得重组质粒pET64-85b-e6。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG(终浓度1 mmol/L)进行诱导,SDS-PAGE电泳分析表达情况,以Ni~(21)亲和层析柱纯化表达的融合蛋白和Western blot分析融合蛋白的免疫活性。结果表明:表达的融合蛋白大约为76 Ku,与预测大小相符,以Ni~(21)亲和层析柱纯化的融合蛋白能与牛结核病阳性血清发生反应。

分类号： S852.61

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