高粱SbCYP79A1基因表达载体的构建及转化玉米研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 李金红

作者: 李金红;霍岩;付莉;翁倩;陶承光;史振声

作者机构:

关键词: 高粱;基因;表达载体;玉米;遗传转化

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2018 年 09 期

页码: 2859-2866

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究SbCYP79A1基因功能及其转化玉米抗虫能力的研究,本试验根据NCBI公布的SbCYP79A1基因序列设计PCR引物,利用高粱品种BTX623克隆到同源性达到100%的SbCYP79A1基因全长cDNA序列,该序列开放阅读框包含1 887 bp,由629个氨基酸组成。构建SbCYP79A1基因植物超表达载体,PCR及测序结果均显示植物表达载体pMDC141-CYP79A1构建成功。将该表达载体导入农杆菌EHA105中,热激法转化到玉米A188幼胚,共培养7 d后,在幼胚检测到GUS基因瞬时表达,说明该农杆菌介导的玉米转化体系的转化效率具有可靠性;经选择培养获得54株转化植株,经PCR鉴定获得38株阳性植株,同时利用GUS基因对阳性植株的叶片和根部进行组织定位分析,均观测到较强的GUS基因表达,进一步验证了PCR检测结果。以上结果均证明高粱的SbCYP79A1基因已经整合到玉米基因组中,该研究结果为进一步获得玉米抗虫的新材料提供依据。

分类号: S513

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