生鲜乳中布鲁氏杆菌多重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杜琳

作者： 杜琳;王丽芳;姚一萍;冯小慧;宋洁;张三粉;史培;申捷

作者机构：

关键词： 布鲁氏杆菌;基因组;多重PCR;快速检测;生鲜乳

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2018 年 09 期

页码： 211-213+218

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立快速、准确检测生鲜乳中布鲁氏杆菌的方法,试验采用细菌基因组提取试剂盒提取生鲜乳中的布鲁氏杆菌基因组DNA,针对布鲁氏杆菌保守抗原Omp31、Omp25设计引物,并设计细菌16S r DNA基因序列作为内参引物,通过引物浓度和退火温度的调整优化,建立了生鲜乳中布鲁氏杆菌的多重PCR检测方法。结果表明:建立的多重PCR检测结果与预期结果一致,可以扩增出布鲁氏杆菌Omp31(472 bp)、Omp25(140 bp)特异性片段以及细菌16S r DNA的通用片段。而对于其他致病菌只能扩增出1 500 bp的细菌16S r DNA通用片段,具有较强的特异性。该多重PCR检测方法灵敏度可达1×105cfu/m L,较单一PCR检测方法灵敏度有所下降。说明本试验建立的检测方法可完成生鲜乳中布鲁氏杆菌的快速检测。

分类号： TS252.7

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