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禽网状内皮组织增生病病毒囊膜蛋白基因的克隆及其原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 瞿晓兰 1 ; 王宏俊 2 ; 陈小玲 2 ; 章振华 1 ;

作者机构： 1.江西农业大学

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词： 禽网状内皮组织增殖病病毒;env基因;克隆;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2006 年 21 卷 S1 期

页码： 154-157

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以本实验室保存的REV毒株为模板,采用RT_PCR技术扩增了REV env部分基因,长为939 bp,并进行亚克隆到pMD18_T质粒载体上,连接、转化、鉴定后得到阳性重组质粒pET_env,将目的片段进行序列分析,结果表明,该REV的env基因与已发表的SNV株、中国HA9901株以及A株同源性均达94%以上,推导的氨基酸同源性为94%以上。将该基因片段与原核表达载体pET_32a重组,并将重组质粒转化至宿主菌BL21中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS_PAGE电泳,免疫印迹和薄层凝胶扫描分析,表达产物与理论推理一致;免疫印迹结果证明,表达的env蛋白可被REV阳性血清所识别。

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