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夹心ELISA定量检测猪圆环病毒2b型抗原方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 杨利 1 ; 张浩明 1 ; 陈瑾 1 ; 乔绪稳 1 ; 侯继波 1 ; 郑其升 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术中心;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

关键词： 猪圆环2型病毒;抗原定量;夹心ELISA;纳米抗体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 987-992

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立快速定量检测猪圆环病毒2b型(PCV2b)抗原含量的方法,本研究采用重组抗PCV2b纳米抗体作为捕获抗体,鼠抗PCV2b单克隆抗体为检测抗体,建立了定量检测PCV2b的夹心ELISA方法。该方法不仅能够用于猪圆环疫苗中PCV2b抗原的检测,还可用于大肠杆菌或杆状病毒表达的PCV2b衣壳蛋白(Cap)亚单位疫苗的检测,且与其它猪病毒无交叉反应。该方法检测细胞培养PCV2b的线性范围是104.3TCID50/mL~105.5TCID50/mL,样品回收率为89.3%~105.6%,该方法批内、批间变异系数小于5%,重复性好。该方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测相同样品时误差值小于10%,并且ELISA检测结果离散度更小。分别用两种方法定量PCV2b抗原,取相同抗原量免疫猪,其诱导产生的PCV2b抗体效价无显著差异。本研究构建的夹心ELISA方法在定量猪圆环疫苗中PCV2b抗原方面,与传统的IFA方法比较其显示了良好的符合性,并具有更好的重复性和更短的检测周期,是替代IFA方法用于PCV2b定量检测的更优选择。

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