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猪流感病毒SYBR GreenⅠ定量RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 张鹏超 1 ; 师小潇 1 ; 哈卓 1 ; 刘永杰 2 ; 刘惠莉 1 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院

2.南京农业大学

关键词: 猪流感病毒;SYBR GreenI荧光定量PCR方法;组织分布

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2010 年 32 卷 10 期

页码: 768-772

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究猪流感病毒(SIV)感染后SIV在体内的分布规律,本研究设计针对SIV NP基因保守区引物,建立了SIV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法对SIV核酸检测灵敏度为30TCID50,对健康猪肺组织cDNA、猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)核酸呈阴性反应。采用建立的荧光定量RT-PCR方法对人工感染A/swine/Shanghai/1/2007/H1N2(Sw/SH/1/2007)猪进行检测,结果显示:病毒在猪鼻腔粘膜持续存在至感染后第8d;肛门拭子在感染后2d~8d可持续检测到病毒核酸;喉头、气管在感染后第3d可检到病毒核酸,并持续至第10d;肺部淋巴结、脾脏在感染后5d~7d检测到病毒核酸阳性;其它脏器均未检测到病毒核酸,从而确定呼吸道系统及脾脏是SIV定殖的主要场所,SIV感染猪后向外排毒周期约为1周。

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