文献类型： 中文期刊

作者： 张业辉 ¹ ; 秦艳红 ¹ ; 乔奇 ¹ ; 张德胜 ¹ ; 田雨婷 ¹ ; 王永江 ¹ ; 张振臣 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院植物保护研究所

关键词： 甘薯脉花叶病毒;外壳蛋白基因;序列分析;原核表达;抗血清

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2011 年 41 卷 01 期

页码： 57-63

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据已报道的甘薯脉花叶病毒(Sweet potato vein mosaic virus,SPVMV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RT-PCR方法克隆了SPVMV河南分离物(SPVMV-HN)基因组3′端1.8 kb的基因片段,包括部分NIb基因序列和完整的CP基因及3′端非编码区序列(3′UTR)。序列分析表明,SPVMV-HN的CP基因由996个核苷酸组成(GenBank登录号为FJ687211),编码332个氨基酸残基。与已发表的SPVMV其他分离物相比,其推导的氨基酸序列一致性为95.2%~98.5%,与SPVMV广东分离物的氨基酸序列一致性为97.9%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPVMV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测。利用SPVMV的抗血清,对采自全国14个省(市)的田间甘薯样品以及嫁接的巴西牵牛样品进行了检测,结果表明,SPVMV在我国甘薯上普遍存在。