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三疣梭子蟹几丁质酶基因(PtCht6)的克隆及其在免疫中的功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 宋柳 1 ; 吕建建 2 ; 王磊 3 ; 孙东方 4 ; 刘萍 2 ;

作者机构: 1.上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心

2.青岛海洋科学与技术国家实验室

3.上海海洋大学

4.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词: 三疣梭子蟹;几丁质酶;白斑综合征病毒(WSSV);副溶血弧菌;低盐胁迫

期刊名称: 海洋与湖沼

ISSN: 0029-814X

年卷期: 2019 年 005 期

页码: 1080-1090

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 几丁质酶(chitinase)在甲壳动物的蜕皮、消化和免疫等很多生物学过程中发挥重要功能,为深入探讨几丁质酶的免疫防御机制,本实验利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)PtCht6基因.该基因cDNA全长2736bp,开放阅读框(ORF)2103bp,编码700个氨基酸,具有几丁质酶GH18家族典型特征.利用实时荧光定量技术分析PtCht6在三疣梭子蟹不同组织、不同蜕皮阶段、不同病原感染以及低盐胁迫(11)下的表达特征,结果显示:PtCht6在各组织中均有表达且在肝胰腺中的表达量最高;在不同蜕皮时期的肝胰腺中,其表达量由蜕皮后期(A/B)、蜕皮间期(C)、蜕皮前期(D)依次递减(P<0.05);人工感染WSSV和副溶血弧菌后.PtCht6的表达量在肝胰腺中分别于12h、72h达到最大值,在血细胞中均于12h达到最大值,且相较于对照组,整体显著上调表达(P<0.05);低盐胁迫能够显著抑制该基因的表达,最高抑制73倍(P<0.05).同时发现,低盐环境下感染WSSV后,该基因达到峰值的时间明显延迟(至少延迟12h.P<0.05).该研究结果预示PtCht6作为免疫因子参与三疣梭子蟹的病原防御,且低盐胁迫在一定程度上抑制了该基因的免疫功能.

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