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大菱鲆受精卵显微注射技术的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 崔忠凯 1 ; 王倩 1 ; 刘新富 1 ; 孟振 1 ; 陈松林 1 ;

作者机构： 1.青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;上海海洋大学水产与生命学院

关键词： 大菱鲆;受精卵;显微注射;GFP

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2018 年 04 期

页码： 30-36

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究将100~300 pg含有肌肉特异表达启动子和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的重组质粒(smyd1:gfp)显微注射到大菱鲆(Scophthalmus maximus)受精卵动物极细胞中,通过细心培育,成功孵化出鱼苗约120尾。统计分析显示,显微注射后,大菱鲆胚胎存活率为4.8%。利用荧光显微镜观察大菱鲆胚胎及仔鱼,只在注射smyd1:gfp质粒的胚胎及仔鱼的肌肉中发现有绿色荧光。通过进一步PCR扩增检测,在注射的大菱鲆胚胎及仔鱼DNA中扩增出了GFP特异片段,大小约为340 bp。研究表明,本研究成功建立了大菱鲆显微注射技术,可为大菱鲆基因功能研究和遗传育种奠定基础。

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