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黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

作者: 许尧兴 1 ; 李艳丽 1 ; 柳永 1 ; 许少春 1 ; 姚晓红 1 ;

作者机构: 1.浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所

关键词: 黑曲霉变种RM48;α-半乳糖苷酶;分离纯化;酶学性质

期刊名称: 浙江大学学报(农业与生命科学版)

ISSN: 1008-9209

年卷期: 2009 年 35 卷 02 期

页码: 147-152

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析,从黑曲霉变种RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析表明,此酶蛋白的分子量约为108kDa.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度是60℃,耐热温度为40℃;最适反应pH为4.5,在pH3.0~6.0之间保持90%以上的酶活性;在实验的金属离子范围内,所有金属离子对黑曲霉变种RM48α-半乳糖苷酶均有抑制作用,其中Cu2+和Fe2+抑制作用最为显著,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+、Mg2+和Co2+对酶活性有轻微的抑制作用.在pH4.0和60℃反应条件下此酶的Km为7.37mmol·L-1,Vmax为5618IU·mg-1·min-1.成熟酶蛋白N端序列为DEKAYSPCYY,与已报道的α-半乳糖苷酶蛋白无同源性.

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