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杀虫基因Cry1Ab的合成、表达及其抗虫性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 岳润清 1 ; 铁双贵 1 ; 齐建双 1 ; 韩小花 1 ; 燕树锋 1 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院粮食作物研究所

关键词： Cry1Ab;人工合成;原核表达;玉米螟;抗虫鉴定

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2014 年 29 卷 06 期

页码： 131-135

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 对苏云金芽孢杆菌Cry1Ab野生型基因的编码区序列进行改造,以获得密码子优化的抗虫基因,构建原核表达载体后,将重组载体转入大肠杆菌进行诱导表达并对诱导蛋白进行抗虫试验。首先根据植物密码子的偏好性及使用频率,优化、改造并人工合成了Cry1Ab基因,序列分析表明:改造后的Cry1Ab基因全长1 848 bp,与原始序列同源性为66%,G+C含量由原来的37.34%提高到63.04%。将改造后的Cry1Ab基因与原核表达载体p ET28b(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性菌液进行诱导表达后,SDS-PAGE分析结果显示:Cry1Ab蛋白在BL21(DE3)细胞中得到高效表达,分子量为70 k Da。喂虫试验结果表明:诱导表达的蛋白对玉米螟具有很强的毒性,幼虫死亡率达到93.33%,而且,存活的玉米螟生长发育也受到明显抑制。该抗虫基因可以作为培育转基因抗虫作物的候选基因。

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