文献类型： 中文期刊
作者： 李文良 1 ; 韩林晓 2 ; 毛立 1 ; 杨蕾蕾 1 ; 张纹纹 1 ; 江杰元 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心
2.南京农业大学动物医学院
关键词： Viperin;原核表达;多克隆抗体;猪
期刊名称： 畜牧与兽医
ISSN： 0529-5130
年卷期： 2015 年 47 卷 10 期
页码： 82-85
收录情况： 北大核心
摘要： 采用PCR方法扩增猪Viperin蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体p ET32a,转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白得到表达,分子质量约为40 ku。进一步优化蛋白表达条件为:IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导5 h。采用His标签单抗对重组蛋白进行Western blot鉴定表明蛋白具有良好的抗原性。将蛋白质纯化后免疫新西兰大白兔,间隔14 d免疫4次,并采集血清。用间接ELISA方法测定血清抗体效价,结果表明,经过4次免疫血清抗体效价达到1∶409600,间接免疫荧光检测出现特异荧光,表明其能与Viperin蛋白发生反应。本试验为研究Viperin的功能、建立特异的检测方法奠定了基础。
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