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牛凝乳酶基因的克隆与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王景会 1 ; 姜媛媛 1 ; 李启云 1 ; 张莉 1 ; 徐波 1 ; 李达 1 ; 杨贞耐 1 ;

作者机构： 1.中国农业科技东北创新中心农产品加工研究中心

关键词： 牛凝乳酶;克隆;表达

期刊名称： 中国乳品工业

ISSN： 1001-2230

年卷期： 2008 年 36 卷 10 期

页码： 9-13

收录情况： 北大核心

摘要： 为了获得大量高纯度高活性的凝乳酶制剂,采用基因工程方法,从犊牛皱胃黏膜细胞中克隆得到凝乳酶基因,然后将此基因插入原核表达载体pTWlN1中,使之与几丁质结合域(CBD)一内含肽(intein)融合,从而获得原核表达质粒pTWIN1/EchybF2。经转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下进行凝乳酶的表达。SDS-PAGE电泳分析和酶活性实验结果显示,CBD-intein-EchybF2融合蛋白在BL21(DE3)中获得高效表达,在低温诱导时主要以可溶性蛋白的形式存在,并具有凝乳活性。

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