文献类型： 中文期刊
作者： 余波 1 ; 罗永成 2 ; 马永兵 3 ; 徐景峨 1 ; 周思旋 1 ;
作者机构： 1.贵州省畜牧兽医研究所
2.贵州省畜牧兽医研究所贵州省水产技术推广站贵阳市水产技术推广站
3.贵阳市农业局
关键词： 致病性嗜水气单胞菌;荧光定量PCR;气溶素基因
期刊名称： 基因组学与应用生物学
ISSN： 1674-568X
年卷期： 2014 年 33 卷 05 期
页码： 1098-1103
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌特异性的气溶素基因序列,设计1对引物,利用普通PCR技术扩增获得hlyA基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了快速检测致病性嗜水气单胞菌的SYBR GreenⅠ荧光定量诊断方法,以此为基础研制出试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对非致病性嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、迟缓爱德华菌、柱状黄杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达1.0x101拷贝/uL。结果表明研制的致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特点,适合于大鲵临床样品的检测。
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