文献类型： 中文期刊

作者： 陈晓 ¹ ; 葛雷 ¹ ; 戴建军 ¹ ; 李丽 ¹ ; 张德福 ¹ ; 吴彩凤 ¹ ; 张树山 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所;锦州医科大学畜牧兽医学院;上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室

关键词： 羊口疮病毒;重组腺病毒;构建;免疫效果

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2018 年 08 期

页码： 1701-1708

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 选取自剪切T2A和P2A肽,连接F1L和B2L基因,构建羊口疮病毒(orf virus,ORFV)重组腺病毒,并对其免疫效果进行评价,为羊口疮的疫苗研制提供依据。应用PCR扩增ORFV-F416毒株的F1L、B2L目的基因,构建重组腺病毒穿梭质粒,穿梭质粒与骨架质粒共转染HEK-293细胞,包装出ORFV重组腺病毒。将重组腺病毒感染MDBK细胞,收集上清液免疫ICR小鼠,并进行间接ELISA、淋巴细胞增殖、ORFV攻毒试验等初步评价小鼠免疫效果。结果显示:成功获得pAV-CMV-F1L-T2A-B2L-P2A-EGFP重组腺病毒,其TCID_(50)为10~(-5.375)·mL~(-1),PCR和IFA检测证实目的基因在基因及蛋白水平上均有表达。ORFV重组腺病毒免疫小鼠后,其抗体水平迅速升高。ORFV重组腺病毒组对特异性抗原ORFV表现出明显的T淋巴细胞增殖能力,极显著高于PBS组(P<0.01)。本文的研究结果表明:F1L和B2L基因重组腺病毒能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,且未影响小鼠正常采食,保护效力较好。