文献类型： 中文期刊

作者： 王聪慧 ¹ ; 赵帅 ¹ ; 张译元 ² ; 王立民 ² ; 李炜杰 ¹ ; 赵兴旺 ³ ; 丁新平 ⁴ ; 张银国 ¹ ; 周平 ² ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

3.石河子市石总场畜牧兽医服务中心

4.新疆西部牧业股份有限公司紫泥泉种羊场

关键词： 电穿孔转染;绵羊成纤维细胞;诱导性多潜能性干细胞

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2015 年 24 卷 09 期

页码： 9-15

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为优化获得绵羊诱导性多潜能干细胞(iPS cell)的诱导条件,通过4-D电转染仪,将含有人Oct4、Sox2及Klf4、c-Myc及lin28基因的3个质粒共转染绵羊成纤维细胞,从EH-100、EN-150、CZ-167、CA-137电转程序筛选出适合绵羊成纤维细胞的电转染程序;探讨不同细胞密度、质粒质量浓度、质粒质量浓度比及维生素C对诱导性多潜能干细胞克隆形成的影响。结果表明,采用EH-100电转程序,在细胞密度为5×106 mL-1、质粒质量浓度比为1∶1∶1、质粒总质量浓度为0.1mg·L-1、培养液中添加维生素C的质量浓度为0.05mg·L-1时,AP染色阳性(AP+)克隆形成的效率可达到14.0%。说明,优化后的电转染方法和培养方案可有效提高绵羊诱导性多潜能干细胞的制备效率。